22. Эксперимент: методология: #286429
Экспериментатор, используя методы генной инженерии, сконструировал несколько вариантов лизоцима, заменив некоторые аминокислоты в этом белке на серосодержащие. В результате количество дисульфидных S–S-связей в белке увеличилось. Затем он исследовал некоторые характеристики полученных вариантов лизоцима A–F. Результаты эксперимента представлены в таблице.
| Вариант лизоцима | Количество дополнительных S–S-связей | Температура денатурации, °C |
|---|---|---|
| A | 1 | 46,7 |
| B | 1 | 48,3 |
| C | 1 | 52,9 |
| D | 2 | 57,6 |
| E | 2 | 58,9 |
| F | 3 | 65,5 |
Какую нулевую гипотезу мог сформулировать исследователь перед постановкой эксперимента? Почему необходимо, чтобы варианты лизоцима не имели других различий в составе аминокислот, кроме количества дополнительных S–S-связей? Объясните, почему результаты эксперимента могут быть недостоверными, если известно, что для измерения температуры денатурации для вариантов лизоцима A–C использовали один прибор, а для вариантов D–F — другой?
Нулевая гипотеза: количество дополнительных дисульфидных S–S-связей не влияет на температуру денатурации лизоцима.
Необходимо, чтобы варианты лизоцима не отличались другими аминокислотами, кроме тех замен, которые изменяют число S–S-связей, потому что другие различия в составе белка тоже могут влиять на его пространственную структуру и устойчивость к нагреванию. Тогда было бы невозможно точно определить, из-за чего изменилась температура денатурации: из-за дополнительных дисульфидных связей или из-за других аминокислотных замен.
Результаты могут быть недостоверными, если варианты A–C измеряли одним прибором, а D–F — другим, потому что приборы могут иметь разную точность, калибровку или систематическую погрешность. В этом случае различия в температуре денатурации могут быть связаны не только со строением лизоцима, но и с особенностями измерения.
По таблице видно, что при увеличении количества дополнительных S–S-связей температура денатурации в целом возрастает. Это позволяет предположить, что дополнительные дисульфидные связи повышают термоустойчивость белка, но для достоверного вывода все варианты нужно сравнивать в одинаковых условиях и одним методом измерения.