Карточки
Тесты
Главная
Курсы
Подписка
22. Эксперимент: методология: #286426
Экспериментатор, используя методы генной инженерии, сконструировал несколько вариантов лизоцима, заменив некоторые аминокислоты в этом белке на серосодержащие. В результате количество дисульфидных S–S-связей в белке увеличилось. Затем он исследовал некоторые характеристики полученных вариантов лизоцима A–F. Результаты эксперимента представлены в таблице.
| Вариант лизоцима | Количество дополнительных S–S-связей | Температура денатурации, °C |
|---|---|---|
| A | 1 | 46,7 |
| B | 1 | 48,3 |
| C | 1 | 52,9 |
| D | 2 | 57,6 |
| E | 2 | 58,9 |
| F | 3 | 65,5 |
Какая переменная в этом эксперименте будет независимой, а какая — зависимой? Какие два условия должны выполняться при постановке отрицательного контроля в этом эксперименте? С какой целью необходимо осуществлять такой контроль?
Независимая переменная — количество дополнительных дисульфидных S–S-связей в молекуле лизоцима, потому что именно этот признак изменял экспериментатор с помощью генной инженерии.
Зависимая переменная — температура денатурации лизоцима, потому что она изменялась в зависимости от количества дополнительных S–S-связей.
По таблице видно, что при увеличении числа дополнительных S–S-связей температура денатурации возрастает. Значит, дисульфидные связи повышают устойчивость белка к нагреванию, так как укрепляют пространственную структуру молекулы.
Для отрицательного контроля должны выполняться два условия:
- В контрольном опыте должен использоваться обычный лизоцим без генно-инженерных замен и без дополнительных S–S-связей.
- Все остальные условия должны быть одинаковыми с опытными вариантами: одинаковая концентрация белка, состав среды, pH, скорость нагревания, метод определения температуры денатурации.
Отрицательный контроль нужен, чтобы сравнить изменённые варианты лизоцима с исходным белком и доказать, что повышение температуры денатурации связано именно с появлением дополнительных дисульфидных связей, а не с другими условиями эксперимента.
20
